首页 | 登录 | 注册 | 职吧 | 我的职脉
    职位关键字 工作地点
工作名称 公司名称 校园招聘
中国最好的工作搜索引擎!
  回复留言  
  大黄中大黄素的提取分离
作者： zojuman  01-01 08:00 　 回复  
 我是做植物功能成分提取的。刚入门，有些问题想请前辈们指点一下。希望能得到解答。谢谢

我要做的是大黄中大黄素的提取分离实验。

我设计的实验方法大致为：

2．实验内容或原理

大黄中的主要成分为蒽醌类化合物，含量约为3-5%，大部分与葡萄糖结合成苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。这些苷元因羟基位置不同而具有不同的酸性，可用碱性强弱不同的溶液进行了梯度萃取得到分离，通过结晶得到相应的物质。对于不能在此条件下分离的组分，可进一步通过硅胶柱层析得到分离。在此过程中可 通过薄层检识获得相应提取进程信息。

3．需用的仪器或试剂等

仪器：粉碎机 烧杯(250、500毫升) 浓硫酸 电炉 布氏漏斗 250毫升分液漏斗

量筒100毫升 真空冷凝管 PH试纸 索氏抽提器 色谱柱(长约12-15厘米) 吸管 保鲜膜 天平 硅胶CMC-Na板 振荡器 紫外可见光灯 层析缸

试剂：乙醚 石油醚（沸程60-90） 乙酸乙酯 碳酸氢钠 盐酸 冷丙酮 冰醋酸或吡啶 碳酸钠 硅胶（100-200目） 氢氧化钠 硫酸

4．实验步骤

⑴酸水解：用天平称取大黄粉10克，置500毫升烧杯中，加20%硫酸水溶液100毫升，直火加热1小时，用布氏漏斗抽滤，过滤，水洗后于70℃左右干燥。

⑵总羟基蒽醌苷元的提取：滤饼经干燥后，置索氏提取器中，加入乙醚150毫升，回流提取2小时，得乙醚提取液。薄层检识可见4个斑点，依RF值由大到小分别为：大黄酚和大黄素甲醚混合物（黄色斑点）、大黄素（橙色斑点）、芦荟大黄素（黄色斑点）、大黄酸（黄色斑点）。

⑶PH梯度萃取分离：

①大黄酸的分离和提纯：将上述乙醚提取液以5%碳酸氢钠溶液振荡提取，水层呈紫红色。分出水层，再重复提取数次，直至不显红色为止。合并水层，用盐酸酸化至PH3左右，即得黄色沉淀。过滤，用水洗沉淀数次，再以少量冰冷的丙酮洗，以除去有色杂质。干燥，以冰醋酸或吡啶结晶2-3次，得黄色针状结晶。经薄层色谱与标准品对照鉴定为大黄酸。

②大黄素的分离和纯化：将上述碳酸氢钠溶液提取后的乙醚层以5%碳酸钠溶液振荡提取数次，水层呈红色，合并水层，加盐酸至酸性，得黄色沉淀，过滤，用水洗沉淀，，再以少量冰冷的丙酮洗，以除去有色杂质。干燥，以冰醋酸或吡啶结晶2-3次，得橙色针状结晶。经薄层色谱与标准品对照鉴定为大黄素。

③芦荟大黄素的分离和纯化：将上述碳酸钠溶液提取后的乙醚层以0.25%氢氧化钠溶液振荡提取数次，水层呈红色，合并水层，加盐酸至酸性，得橙色沉淀，过滤，用水洗沉淀，干燥，以冰醋酸或乙酸乙酯中结晶数次，得橙色长针状结晶。经薄层色谱与标准品对照鉴定为芦荟大黄素。

④大黄酚和大黄素甲醚的分离和纯化：将上述0.25%氢氧化钠溶液提取后的乙醚层以5%氢氧化钠溶液振荡提取数次至无色。水层呈深红色，合并水层，加盐酸至酸性，得黄色沉淀，过滤，水洗沉淀，干燥后得大黄酚和大黄素甲醚混合物。将此混合物溶于乙酸乙酯，用硅胶柱色谱分离。洗脱剂为石油醚（沸程为60-90℃）-乙酸乙酯（15：1）混合液。先洗脱下来的为大黄酚，后洗脱下来的是大黄素甲醚，再分别以乙酸乙酯结晶纯化，经薄层鉴定为纯品。

⑷硅胶柱色谱精制大黄素

①装柱：取100-200目硅胶约10克，按干法装柱（柱床1.5㎝×8.5㎝）;

②加样：将大黄素粗提物溶解于5毫升石油醚（沸程为60-90℃）-乙酸乙酯（7：3）混合液中，用吸管吸取样品溶液于色谱柱床顶端；

③洗脱：用石油醚（沸程为60-90℃）-乙酸乙酯（7：3）混合液为洗脱液，分段收集，每份10毫升，用硅胶薄层板跟踪检查。



不知道可不可行，或者哪些方法需要、可以改进。还望大家能够帮助一下，万分感激！！
  回复：大黄中大黄素的提取分离
作者：   01-01 08:00 　 回复  
 
  回复：大黄中大黄素的提取分离
作者： cc6329bjdml  07-19 10:45 　 回复  
  我不是作药理的，只是学化学的，我也做过类似的工作，所以谈谈我的看法：

1、酸水解：酸度太高，最高应在10%以下，以5%为宜。理由：a、不需要这么多的酸，因为生物碱在植物体内一般最多不超过1%；酸度太大会引起纤维素水解，水解产物影响提取效果；

2、大黄酸的分离和提纯：乙醚挥发性太强，宜以乙醚乙醇混合液提取（比例3：7或4：6）；

3、大黄素的分离和纯化：因为生物碱呈碱性，经碳酸钠/碳酸氢钠溶液振荡提取后，呈沉淀状，可先行萃取，再行分离提纯。用盐酸调酸度后，生物碱部分成盐，影响最后提纯态物质性质的测定。
标　题:
内　容:
用户名:
  游客
 
 
Copyright©2005-2007, 版权所有 WWW.JOBMET.COM
ICP证：京ICP备06019556号